電泳儀、電泳槽的使用方法 電泳儀:電泳技術是分子生物學研究*的重要分析手段。電泳一般分為自由界面電泳和區帶電泳兩大類。自由界面電泳不需要支持,例如等電聚焦電泳、等速電泳、密度梯度電泳和微電泳。這些類型的電泳目前很少使用。 .對于區域電泳,各種類型的物質被用作支持物。常用的載體有濾紙、醋酸纖維素薄膜、非凝膠載體、凝膠載體和硅膠-G薄層。分子生物學領域z常用的是瓊脂糖凝膠電泳。所謂電泳,是指帶電粒子在電場中的運動。不同的物質由于其不同的電荷和分子量而在電場中以不同的速度運動。根據這一特點,電泳的應用可用于不同物質的定性或定量分析。 ,或對某種混合物或提取物進行成分分析,制備單一成分,在臨床檢驗或實驗研究中具有重要意義。本電泳儀就是根據上述原理設計制造的。下面簡單介紹一下它的使用方法和注意事項。 ● 使用方法 1、首先用導線將電泳槽的兩個電極與電泳儀的直流輸出端連接起來,注意不要接反。 2. 將電泳儀電源開關調至關閉位置,將電壓旋鈕旋至最小。根據工作需要選擇電壓電流量程和電壓電流量程。 3、打開電源,慢慢旋轉電壓調節旋鈕,直到達到所需電壓,設置電泳終止時間,此時開始電泳。 4、工作完成后,應將旋鈕和開關旋至零位或關閉,并拔出電泳插頭。 筆記 1、電泳儀通電進入工作狀態后,禁止人體接觸電極、電泳物體等可能帶電的部位,也禁止在電泳槽內取放東西。如有必要,請先斷電,以免觸電。同時要求儀器必須有良好的接地端子,以防漏電。 2、儀器上電后,請勿臨時加裝或拔出輸出線插頭,以防短路。雖然儀器配備了保險絲,但短路仍可能對儀器造成損壞。 3.由于不同介質支架的電阻值不同,電游泳時通過的電流量也不同,游泳速度和游到終點所需的時間也不同,所以不同介質載體的電泳不宜同時在同一臺電泳儀上進行. 4、總電流不超過儀表額定電流(最大電流范圍)時,可多槽聯用,但注意不要過載,否則容易影響儀表壽命。 5、在某些特殊情況下,需要檢查儀器的電泳輸入時,允許在穩定電流狀態下空載開機,但在穩定電流狀態下,必須接好負載后再開機,否則電壓表的指針會大幅度跳動,容易造成不必要的人為損壞。 6、在使用過程中如發現噪音大、放電或有異味等異常現象,必須立即切斷電源并進行維修,以免發生意外。 夾層式立式電泳槽使用方法: 1. 組件 (1) 一對裝有鉑絲的儲液罐,裝有冷卻裝置和電泳緩沖液出口。 (2)凹膠框配玻璃板,可分別制作1mm、1.5mm厚的凝膠板。操作時要選擇厚度合適的玻璃板和梳子配合使用。 (3) 樣品孔模具(梳子)用于電泳上樣。 (4) 固定儲液罐的螺桿和螺母有4對,28D和30型有5對。 (5) 五個橡膠管。兩條長條用于連接冷卻水的進出水口;兩個中等長度用于連接電極緩沖;介質液體的流出端口;最短的一個用于連接儲液罐之間的冷卻水。 (6) 電線 1 對。 ● 2. 如何使用 (1) 清洗部件 上述部件在組裝前應*清潔。特別是玻璃板和凹槽橡膠框必須用海綿蘸少許肥皂粉或清潔劑*清潔。清洗后的玻璃板在使用前應放在玻璃板架上晾干。 (2) 組裝電泳槽 A、 1. 將四個固定螺釘分別插入儲液架(半上罐)的相應孔中,然后將儲液架放在桌面上。 2、左手握住凹槽橡膠模架,右手拇指和中指握住玻璃板的兩側邊插入橡膠模架(注意手指不能碰到上面的玻璃)充滿膠水的表面)盤子)。 3、將帶玻璃的橡膠模架放在倒置的儲液罐框架上,其下邊緣必須與儲液罐框架的下邊緣對齊。 4、雙手握住另一個儲液罐框架,與放在桌面上的儲液罐框架相匹配,在儲液罐有機玻璃框架中心的橡膠框架上做凸出線。 5. 安裝四個螺母并擰緊螺釘。注意擰緊螺絲時用力要均勻,最好用雙手在斜角處逐漸擰緊。 6、將電泳槽垂直立起,放在桌面上。玻璃板短的儲液槽稱為上槽(陰ji端),玻璃板長的儲液槽稱為下槽(陽極duan)。玻璃板與膠框之間有間隙。這個間隙可以沿著長玻璃板的下端填充融化的 10% 瓊脂。為防止氣泡滯留,可輕輕抬起一端將氣泡去除。在瓊脂*凝固之前不要倒入凝膠。 B、也可以垂直豎立凹槽,將帶玻璃的橡膠模架直接放入凹槽中,對稱擰緊螺絲,底部邊緣用瓊脂密封。 (3)灌膠 1、先灌分離膠,待凝固后再倒濃縮膠。灌膠前先連接好冷卻水,并夾住連接上下儲液罐的兩根膠管。 2. 用細尖滴管吸膠,從一端沿著長短玻璃板的間隙滴加膠水。為了防止氣泡的產生,可以將另一端稍微挑起(氣泡往上),不斷加膠。如果用單層膠(分離膠),加膠量在距離短玻璃板上端0.3厘米左右,輕輕加少許水,雙手輕輕插入梳子,凹出小樣凝膠化后可形成注射孔。 3、為防止漏膠,應立即在上下儲液槽中加入蒸餾水,但蒸餾水不得超過短玻璃板的上緣。 4、凝膠凝固后,可以看到樣品槽的梳子和凝膠板之間有一層不同折射率的亮區。 (4) 添加樣本 1、松開連接上下儲液罐的兩根橡膠管上的夾子,放出罐內的蒸餾水,待水用完后再夾住夾子。 2、雙手輕輕取出加樣梳,可以看到加樣孔邊界清晰,吸干孔內的水分(注意不要沿孔邊緣損壞字面)。 3、上下儲液罐加緩沖液;對于中間液體,液體高度應超過上儲液罐短玻璃板的上沿。 4、用微測量注射器吸取一定量的樣品,加到長短玻璃板之間的凹形凝膠樣品孔中(注意加樣動作要輕,針頭不要損傷凝膠表面)。 (5) 電泳 第一儲液器的引線連接到電泳儀的負極,下儲液器的引線連接到電泳裝置的正極。檢查電路是否正確后,才能按要求的電壓和電流進行電泳。 (6)取出塑料板 電泳完畢,擰下螺母,取出塑料框,撕下玻璃板,在兩塊玻璃板下角的縫隙中,用刀片背面輕輕撬動,然后將塑料面和一個分開玻璃板,將帶膠板的玻璃板放在桌面上,雙手沿凝膠底部輕輕提起薄膜,放入大培養皿中進行染色。膠板經過漂洗脫色后可以清晰看到膠條分開。 |